Sections
Accueil UNamur > Agenda > Défense de thèse en Sciences biologiques - Emilie BAUWENS
événement

Défense de thèse en Sciences biologiques - Emilie BAUWENS

Étude de la sénescence induite prématurément par les stress UVB dans les kératinocytes épidermiques normaux humains

Catégorie : défense de thèse
Date : 24/09/2021 15:00 - 24/09/2021 18:00
Lieu : PA02
Orateur(s) : Emilie BAUWENS
Organisateur(s) : Florence CHAINIAUX

Jury

  • Prof. Patricia RENARD (département de biologie, UNamur), présidente
  • Dr Florence CHAINIAUX (département de biologie, UNamur), secrétaire
  • Dr Olivier PLUQUET (Institut Pasteur, France)
  • Prof. Isabelle PETROPOULOS (Sorbonne Université, Paris, France)
  • Prof. Yves POUMAY (département de médecine, UNamur)

Résumé

Ce travail s’articule autour de l’étude de la sénescence du kératinocyte épidermique normal humain(NHEK).Ce type cellulaire est très peu étudié en sénescence, le fibroblaste, modèle cellulaire historique utilisé par Hayflick, restant le modèle d’étude par excellence. Il est toutefois connu que le profil de sénescence peut varier suivant le type cellulaire et le contexte, il semble donc important d’étudier la sénescence des cellules épidermiques telles que les NHEKs. Tout comme les fibroblastes, des kératinocytes sénescents s’accumulent dans la peau avec l’âge. Or, l’accumulation de ces cellules sénescentes dans les tissus, est reconnue comme une caractéristique majeure du vieillissement. De plus, ces cellules sénescentes semblent participer au dérèglement de l’homéostasie tissulaire et à la promotion tumorale. L’épiderme étant la couche la plus externe de la peau, les kératinocytes sont fortement exposés à divers stress exogènes, tels que l’exposition aux rayonnements solaires, et spécialement aux rayons UV. Ceux-ci entraînent un vieillissement cutané prématuré, ou photo-vieillissement, et participent au développement de lésions tumorales. Dans ce contexte, l’objectif de cette thèse de doctorat est d’étudier et de caractériser, dans des NHEKs, la sénescence induite par l’exposition répétée aux rayons UVB (UVB-SIPS) et de la comparer à la sénescence «pseudo-réplicative», obtenue suite à des passages successifs en culture.

La première partie de ce travail a consisté en la mise au point d’un modèle in vitro de SIPS-UVB dans les NHEKs. En exposant ces cellules de manière répétée à une dose subcytotoxique d’UVB nous avons induit un phénotype sénescent montrant un arrêt irréversible du cycle cellulaire, une augmentation de la proportion de cellules positives à la SA-betagalactosidase, des dommages à l'ADN non réparés et une activation à long terme de la réponse aux dommages à l'ADN (DDR). En parallèle, nous avons également mis en avant ces marqueurs dans un modèle de senescence induite par passages successifs en culture (sénescence pseudo-réplicative) chez les NHEKs. Sur base d’une analyse transcriptomique RNAseq, nous avons mis en évidence que les NHEKs sénescents présentent une diminution de l'expression de plusieurs transporteurs d'acides aminés, associée, chez les NHEKs en SIPS-UVB, à des niveaux intracellulaires réduits de glycine, d'alanine et de leucine. Ceci pourrait être reconnu comme un nouveau marqueur de sénescence d’autant plus qu’il est également observé chez les fibroblastes en sénescence réplicative. De plus, l'inhibition chimique du transporteur de glycine SLC6A9/glyt1 est capable d’induire certains marqueurs de sénescence chez les NHEKs. Dans un deuxième temps, nous avons étudié le profil de sécrétion des NHEKs en SIPS-UVB, par une étude avec a priori de l’expression génique des interleukines IL-6 et IL-8, de certains facteurs de croissance ou encore de la métalloprotéinase MMP-9, basée sur le SASP des fibroblastes sénescents. Cette première approche a permis de mettre en avant une modification dans l’expression de ces facteurs survenant au cours du temps. Par la suite, nous avons réalisé une analyse protéomique sans a priori afin de déterminer le SASP des NHEKS en SIPS-UVB à différents temps après induction. Il semble ainsi que ce SASP, bien que présentant des facteurs communs aux différents timing, possède des facteurs propres à chaque timing. De plus, ces facteurs sécrétés sont en partie retrouvés dans le SASP d’autres types cellulaires. Nous rapportons de plus que les NHEKs sénescents (pseudo-réplicative et SIPS-UVB) sécrètent des facteurs protéiques qui influencent la migration des cellules cSCC A431, effet qui n’avait encore jamais été rapporté pour le SASP des NHEKs sénescents.

Télecharger : vCal